青岛菲优特检测有限公司

实时荧光定量PCR技术以其特异性强、灵敏度高、重复性好、定量准确、速度快、全封闭反应等优点成为了分子生物学研究中的重要工具。

Q-PCR有三个特别重要的指标

扩增溶解曲线

扩增曲线是PCR过程中，以循环数为横坐标，以荧光强度为纵坐标所绘制的曲线。主要用于反映Q-PCR的动态进程。

溶解曲线是用来验证扩增产物特异性的，如果产物是单一条带，溶解曲线就会出现单峰;如果有引物二聚体或其它非特异性扩增，就会出现至少两个峰。

荧光阈值

一般将PCR反应前15个循环的荧光信号作为荧光本底信号，荧光域值是PCR3-15个循环荧光信号标准差的10倍，荧光域值设定在PCR扩增的指数期(分为基线期、指数期以及平台期)。

Ct值

PCR扩增过程中，扩增产物的荧光信号达到设定的阈值时所经过的扩增循环次数。

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